做和高效液相色谱法测定水中多环芳烃

高效液相色谱法测定水中多环芳烃

摘 要：本文拟定了测定饮用水、地表水和地下水中萘(NpH)、荧蒽(FLU)、苯并(b)荧蒽(BbF)、苯并(k)荧蒽(BkF)、苯并(a)芘(BaP)、苯并(ghi)北(BPer)、和茚并(1，2，3—Cd)芘(IP)七种多环芳烃(PAH)的高效液相色谱分析法。本方法的最低检测量(单位：ng)分别为：NpH0.10，FLU0.03，BbF0.01，BkF0.002，BaPO.01，Bper0.04，IP0.08。若取水样1000ml，进样量为20μ1，则最低检测浓度(单位：μg/L)分别为：NpH0.005，FLU0.0015，BbF0.0005，BkFO.0001，BaPO.0005，Bper0.002，IP0.004。

1 方法原理

采用正己烷提取水中多环芳烃，提取液经无水硫酸钠脱水，并通过0.45tan滤膜过滤去除杂质，浓缩至一定体积后，用配备荧光和紫外检测器的高效液相色谱仪进行定量测定。

2 试剂和材料

2.1 高效液相色谱流动相：甲醇， HPLC纯或优级，使用前经0.45μm过滤和脱气。

2.2 标准溶液

2.2.1 标准储备液：各种多环芳烃(PAH)的标准储备液均购自国家标准物质研究中心。使用前用甲醇(2.1)将各PAH标准储备液稀释成浓度(单位：ng/ml)分别为NpH500， FLUl00，BbFSO，BkFl0，BaP50，Bper200，IP300的标准液，保存于4℃冰箱中备用。

2.2.2 混合PAH标准溶液：于l0ml容量瓶中加入稀释后的FLU、BbF、BkF、BaP、BPer、IP标准液(2.2.1)各1.00±0.01ml，用甲醇(2.1)稀释至标线，配成各组分浓度(单位：ng/ml)分别为FLUl0.0，BbF5.0，BkFl.0，BaP5.0，Bper20.0，IP30.0的混合PAH标准溶液。

2.2.3 萘标准溶液：于10ml容量瓶中加入稀释后的萘标准液(2.2.1)1.00±0.0lml，用甲醇(2.1)稀释至标线，配成NpH浓度为50.0ng/ml的标准溶液。

2.3 水样预处理试剂

2.3.1 正己烷：HPLC纯，必要时重蒸馏，浓缩50倍后在待测组分的检测限内不出现色谱峰。

2.3.2 无水硫酸钠(NaaS04)：分析纯无水硫酸钠经400℃灼烧2小时，保存于干燥器中备用。

2.3.3 硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2大家是要留意这个状态的O)：分析纯。

2.4 实验用水：Mill-Q超纯水。

3.仪器

3.1 高效液相色谱系统

3.1.1 515恒流泵：Waters公司，流速精度为：0.001ml/min。

3.1.2 色谱分析柱：Supelcosil PAH专用柱，15craX4.6mm，5μm。

3.1.3 474荧光检测器：Waters公司，具有激发/发射光谱扫描及编程功能。

3.1.4 486紫外检测器：Waters公司竹纤维(即竹原纤维)。

3.1.5 717自动进样器：Waters公司。

3.1.6 恒温柱箱：Waters公司。

3.1.7 色谱工作站：Millennium32色谱管理软件，Waters公司。

3.2 振荡器：可调速、定时。

3.3 抽滤装置：用于流动相甲醇抽滤脱气的抽滤装置应与用于样品预处理的抽滤装置分开使用。

3.4 恒温水浴。

3.5 玻璃器皿

3.5.1 采样瓶：1000ml带磨口玻璃塞的棕色细口瓶。

3.5.2 分液漏斗：1000ml，玻璃活塞不涂润滑油。

3.5.3 量筒：1000ml。

3.5.4 比色管：50ml。

3.5.5 浓缩管：50ml。所有玻璃实现更大的合作双赢器皿均需经过铬酸洗液浸泡，清洗干净，最后用超纯水清洗。

4 水样

4.1 水样的性质

水样中的PAH易吸附于颗粒物或容器壁上，且对光敏感。水样中残余氯对其稳定性有影响。

4.2 水样的采集

水样必须采集在棕色玻璃容器中，采样前不能用水样预洗瓶子，以防止样器的沾染和吸附，在采样点采样及盖好瓶塞时，水样瓶要完全注满，不留空气。若水中有残余氯存在，要在，每升水中加入80mg硫代硫酸钠(2.3.3)除氯。

4.3 水样的保存

水样应放在暗处，4℃冰箱中保存。采样后应尽快在24小时内进行萃取。萃取后的样品若不能立即分析，应放在暗处，4℃冰箱中保存，并在40天内分析完毕。

4.4 水样的预处理

4.4.1 水样的萃取：摇匀水样，用1000ml量筒(3.5.3)量取1000ml水样(萃取所用水样体积视具体情况而定，可增减)于1000m1分液漏斗(3.5.2)中，加入50ml正己烷(2.3.1)，手摇分液漏斗，放气几次后，安装分液漏斗于振荡器架上(3.2)振摇5min进行萃取。取下分液漏斗静置约15—30min(静置时间视两相分开情况而定)，弃去水相。

4.4.2 萃取液的脱水净化

4.4.2.1 抽滤装置的准备：在抽滤装置中放置0.45μm滤膜，滤膜上覆盖g无水硫酸钠(2.3.2)，用少量正己烷(2.3.1)润湿。将50m/比色管(3.5.4)放入滤瓶中，盛接过滤的萃取液。

4.4.2.2 萃取液的净化：启动抽滤装置电源，将苹取液全部转入抽滤装置进行抽滤。将过5个影响电子万能试验机优劣的因素滤后的萃取液转入浓缩管中(3.5.5)，待浓缩。

4.4.2.3 萃取液的浓缩：将盛有萃取液的浓缩管放入恒温水浴(3.4)中，在℃的水温下浓缩1.0ml，留待HPLC分析。

5 操作步骤

5.1 色谱条件的选择

5.1.1 流动相：萘：甲醇：水(V/V)=80：100；其它PAH：100%甲醇(2.1)

5.1.2 洗脱模式及洗脱流速：本方法使用等度洗脱，洗脱速率为1.0ml/